Fomentando las ciencias de la vida mediante instrumentación innovadora
Dispositivos científicos utilizados en neurociencia, biología celular e investigación cardíaca centrados en sistemas de electrofisiología e imágenes
ALA Scientific Instruments ofrece una amplia gama de productos y servicios para la investigación electrofisiológica, incluidos registros intracelulares, extracelulares y de parche.
Podemos ayudarlo con muchas aplicaciones de electrofisiología para su investigación. Algunos ejemplos de aplicaciones incluyen…
Registro de un solo canal
El registro de un solo canal se logra presionando una pipeta de vidrio pulida al fuego, que se ha llenado con una solución electrolítica adecuada, contra la superficie de una célula y aplicando una ligera succión.
En tales condiciones, la pipeta de vidrio y la membrana celular estarán a menos de 1 nm de distancia. Cuanto más hermético sea el sello, tendrá dos ventajas:
- mejor aislamiento eléctrico del parche de membrana
- una alta resistencia del sello reduce el ruido de corriente del registro, lo que permite una buena resolución temporal de corrientes de un solo canal, corrientes cuya amplitud es del orden de 1 pA.
Clásicamente, se pueden utilizar tres configuraciones diferentes de la membrana parcheada para la grabación de un solo canal: parches adheridos a la célula, parches de afuera hacia afuera y parches de adentro hacia afuera. La configuración adherida a la célula contacta con la membrana celular formando un sello de gigaohmios. En esta configuración se pueden realizar grabaciones estables a largo plazo con bajo ruido de fondo con una interrupción mínima del medio intracelular. En la configuración de afuera hacia afuera, la superficie externa del parche está expuesta al medio de grabación externo, lo que ofrece la oportunidad de exponer repetidamente los canales a diferentes fármacos y en varias concentraciones. En la configuración de parche de adentro hacia afuera, es la cara interna de la membrana la que está expuesta a la solución externa. Esto proporciona acceso a los sitios de unión de receptores intracelulares y también permite estudios de vías de señalización intracelular.
Ahora es posible registrar la actividad de corriente de un solo canal de muchos tipos de células, es decir, de especies de mamíferos, insectos, invertebrados y también plantas. El registro de corrientes de un solo canal permite análisis cinéticos detallados de canales iónicos nativos y recombinantes, incluidos aquellos que han sido sometidos a mutaciones naturales o intencionadas en su estructura.
Registro de células completes
El registro de células completas es la configuración más utilizada de la técnica de fijación de parches. Se logra rompiendo el parche de membrana aislado por la pipeta de parches, poniendo en contacto el interior de la célula con el interior de la pipeta. Al utilizar el diseño experimental de fijación de parches de células completas, se puede registrar la actividad eléctrica de toda la célula a través de varios modos. La fijación de voltaje, donde se controla la diferencia de potencial a través de la membrana celular y se mide la corriente, o la fijación de corriente, que controla la corriente y mide el voltaje a través de la membrana, son los dos modos principales de registro de células completas. Estas configuraciones de registro son técnicas muy potentes en el estudio de la actividad de los canales iónicos, aspectos del comportamiento neuronal y la transmisión sináptica. Nuestra gama de amplificadores es perfecta para realizar registros de fijación de parches de células completas.